熒光顯微鏡使用注意事項有哪些?在眾多顯微鏡使用過程中,熒光顯微鏡使用注意事項還是挺多的,下面小編簡單和大家介紹幾點。
1、觀察對象須是可自發(fā)熒光或已被熒光染料染色的標本。??
2、應在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛完全適應暗室,再開始觀察標本。????
3、載玻片、蓋玻片及鏡油應不含自發(fā)熒光雜質,載玻片的厚度應在0.8~1.2mm之間,太厚可吸收較多的光,并且不能使激發(fā)光在標本平面上聚焦。載玻片須光潔,厚度均勻,無油漬或劃痕。蓋玻片厚度應在0.17mm左右。??
4、防止紫外線對眼睛的損害,在調整光源時應戴上防護眼鏡。???
5、選用效果好的濾光片組。
6、檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以不得超過2~3h。?
7、熒光標本一般不能長久保存,若持續(xù)長時間照射(尤其是紫外線)易很快褪色。因此,如有條件則應先照相存檔,再仔細觀察標本。??
8、熒光顯微鏡光源壽命有限,啟動高壓汞燈后,不得在15min內將其關閉,一經關閉,須待汞燈冷卻后方可再開啟。嚴禁頻繁開閉,否則,會大大降低汞燈的壽命。標本應集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。中應避免數(shù)次點燃光源。??
9、標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱(在熒光顯微鏡使用注意事項中尤為重要)。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。????
10、若暫不觀察標本時,可拉過阻光光簾阻擋光線。這樣,既可避免對標本不必要的長時間照射,又減少了開閉汞燈的頻率和次數(shù)。??
11、熒光亮度的判斷標準:一般分為四級,即“一”—無或可見微弱熒光?!?”—僅能見明確可見的熒光?!?+”—可見有明亮的熒光?!?++”—可見耀眼的熒光。????
12、較長時間觀察熒光標本時,一定要戴能阻擋紫外光的護目鏡,加強對眼睛的保護。在未加入阻斷濾光片前不要用眼直接觀察,否則會損傷眼睛。?
13、激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應用擋板遮蓋激發(fā)光。??
14、作油鏡觀察時,應用“無熒光油”。????
15、熒光幾乎都較弱,應在較暗的室內進行。?
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